原核转录组测序

原核转录组测序是基于HiSeq平台,构建链特异性文库研究原核生物在某个时期或者在某种环境条件下转录出来的所有mRNA。由于原核生物mRNA没有polyA尾结构,需要去除rRNA的特点,奥维森针对不同的研究物种采取有效的方法去除rRNA,保证数据质量。

1、技术路线

2、技术参数

3、技术参数
样本类型 样本量 样本纯度 周期 备注
RNA/菌体 菌体样本:5g OD260/280=1.9-2.2,RIN值≥7,23S:16S≥1.0,确保RNA无降解 35-40工作日 样品保存期间切忌反复冻融,送样时请使用冰袋或干冰运输
RNA:1ug
4、案例解读
RNA-Seq揭示mef/mel(msr(D))介导的大环内酯素对S型肺炎链球菌的抗性调控机制
      研究背景:肺炎链球菌和一些革兰氏阴性菌中出现大环内酯素抗性,是因为在mef/mel(msr(D))操纵子上编码外排泵的离散移动基因元件越来越多,但是这种调控机制尚不清楚。
       研究结果:研究发现了mef(E)/mel 转录起始,定位了mef(E)/mel 启动子位置以及证明了转录衰减作用作为大环内酯素诱导,mefjie'dao介导的大环内酯素对S型肺炎链球菌的抗性机制。

                                         RNA-Seq转录组分析
参考文献
Chancey, S. T. et al. Transcriptional attenuation controls macrolide inducible efflux and resistance in Streptococcus pneumoniae and in other Gram-positive bacteria containing mef/mel(msr(D)) elements. PLoS One 10, e0116254, doi:10.1371/journal.pone.0116254 (2015).